1994年，何美钿签约成为香港无线电视台（TVB）旗下合约艺人。

1995年，参演了由温兆伦、郭蔼明、宣萱等主演的神话爱情剧《天降奇缘》，由此开始了演艺生涯；随后又出演了由陈锦鸿、周慧敏、梁艺龄等领衔主演的民国爱情剧《刀马旦》，在剧中饰演涉世未深的小师妹“阮菊玲”。

1996年6月24日，与吕颂贤、梁艺龄、陈少霞等共同主演的古装武侠剧《笑傲江湖》首播，何美钿在剧中饰演天真单纯、温柔体贴的恒山派小尼姑“仪琳”，由此崭露头角；11月，由刘仕裕执导，张卫健、江华、黎耀祥等领衔主演的古装神话剧《西游记》播出，何美钿在剧中出演“哪吒”。

1997年，参演了由李添胜执导，黄日华、陈浩民、樊少皇等领衔主演的古装武侠剧《天龙八部》，何美钿在剧中饰演天真烂漫的“钟灵”。

1999年，与张卫健、恬妞、樊少皇等合作主演了古装武侠喜剧《少年英雄方世玉》，在剧中饰演天生温柔善良且厨艺高超的孤女“凌小小”。

2000年，与张卫健、黄文豪、樊亦敏联袂主演了由鞠觉亮和郑健荣执导的古装武侠剧《棋武士》，饰演为父报仇心切而整日练功，不幸走火入魔的叶夜心。

2001年，何美钿加入“星际大站”成为旗下艺人；随后，与张卫健、李冰冰、薛佳凝等联袂主演了由马精武、靳德茂执导的古装喜剧《机灵小不懂》，饰演温文尔雅、外柔内刚的“应籽福”。

2002年，与吴京、沈晓海、李小冉领衔主演了由汪骏执导的武侠剧《金蚕丝雨》，何美钿饰演云飞扬青梅竹马的恋人“伦婉儿”。

2003年，与黄晓明、郑家榆、毛乐共同主演了由朱德承、余明生执导的古装喜剧《风流少年唐伯虎》，何美钿出演武功、厨艺都精湛的华府厨师“石榴”。

2004年7月1日，与吴樾、舒畅、六小龄童等合作主演的古装武侠剧《连城诀》首播，何美钿饰演女一号“戚芳”，是狄云青梅竹马的师妹和挚爱；9月12日，获得天津日报报业集团颁发的津报读者奖最受欢迎古装女演员奖；9月13日，与钟汉良、寇世勋、恬妞等联袂主演的古装武侠剧《白手风云》首播，何美钿出演冰雪聪明、娇俏可爱的“上官雁”；10月1日，与陈龙、徐少强、白庆琳共同主演的古装动作片《剑侠传奇》上映。

2005年1月4日，与林志颖、胡可、李宗翰合作主演的古装言情剧《书剑情侠柳三变》播出，何美钿扮演敢爱敢恨的江湖小侠“虫虫”；9月24日，与萧正楠、何润东、罗海琼领衔主演的饮食题材古装剧《中华小当家》播出，何美钿在剧中饰演很有个性的点心高手“蜜糖”。

2006年，何美钿与萧蔷、钟汉良、陈龙等共同主演了根据梁羽生同名小说改编的古装武侠剧《侠骨丹心》，她在剧中饰演清纯可爱、直率刁蛮的“仲燕燕”。

2007年，参演了由尔冬升执导，刘德华、古天乐、吴彦祖等领衔主演的剧情片《门徒》。2008年，与关智斌、张檬、罗家英等共同主演了由张箐执导的惊悚片《荒村客栈》。

2010年，与连凯、徐少强、柳海龙等主演了数字电影《水浒英雄谱》之《鼓上蚤时迁》，在片中饰演与时迁有着情感纠缠的“神偷苏师妹”。

2011年，参演了由刘镇伟执导，陈奕迅、莫文蔚、郑伊健等主演的喜剧电影《东成西就2011》，何美钿在片中饰演身怀绝技的周董秘书。

2012年，与陈怡蓉、焦恩俊、翁虹等共同主演了年代家庭励志剧《南国有佳人》，在剧中饰演传统的中国女人“陈雪琳”；12月5日，与普超英、宗峰岩、郑岚侨等领衔主演的青春励志电影《飞扬的青春》上映，何美钿饰演可爱善良的乡村女孩“小果子”。

2013年9月，参演的革命题材剧《风雷急》开机。2014年3月14日，参演的爱情魔幻电影《非狐外传》上映；4月20日，与吴京安、章婷婷、于又川等主演的战争片《密战黑茶山》上映。

2017年1月3日，由黄祖权执导，吴磊、陈翔、张予曦等领衔主演的古装奇幻剧《奇星记之鲜衣怒马少年时》首播，何美钿在剧中饰演身手不凡的十三姐“黄千寻”。